2006年广州市普通高中= 毕业班综合测试(二)

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【题目】

【参考答案】<= span lang=3DEN-US>

【参考资料一】=

中华= 人民共和国国家标准

粮食、油&#= 26009;检验

色泽、气&#= 21619;、口味鉴定法

GB 5492-85

（本标准&#= 36866;用于商品粮食、油Ą= 09;的色泽、气味、口味= 的鉴定）

附 录<= span lang=3DEN-US> A　　粮食新、陈试验 (参考= 件)

A.1 愈创木酚反应= 法

A.1.1<= span style=3D'font-family:SimSun;mso-ascii-font-family:"Times New Roman";mso-ha= nsi-font-family: "Times New Roman"'>　取粮食试样50～= 100粒置于试管内，= 加入1％঴= 0;创木酚溶液(将原液用&#= 27700;稀释100倍<= span lang=3DEN-US>)2ml振动= 后，再加3％过氧化&#= 27682;溶液1～= 3滴，振动后放置= 片刻，粮粒和溶液便ਹ= 4;色。同时作对照试验&= #27604;较，显色越深，表= 034;酶的活动越强，说明= ;粮食新鲜程度较大。

A.1.2<= /st1:chsdate> 取大米约5g置于试管中，加= 1％঴= 0;创木酚溶液10ml，振= 动20次左右，将愈创木酚液ల= 7;入另一试管中，静置&= #21518;，加入1％过氧化&#= 27682;溶液3滴，在静置状态下，观察愈创木酚液ਹ= 4;色程度。如是新米，&= #32463;过1～= 3min，白浊的= 840;创木酚溶液从上部= 开始呈浓赤褐色；陈米则完全不着色&= #65307;如是新、陈米混合,新米比例&#= 22823;,呈色反应&#= 24555;，而且呈浓赤褐色；陈米比例大，呈色&= #21453;应慢，而且呈淡赤#= 088;色。

【参考资料二】=

植物生理&#= 23398;实验：过氧化物酶ė= 63;性的测定

一、目的

过氧化物酶广泛存ß= 12;于植物体中，是活性= 较高的一种酶。它与= 1628;吸作用、光合作用ࡡ= 0;生长素的氧化等都有&= #20851;系。在植物生长发 = 946;过程中它的活性不断= ;发生变化。一般老化&#= 32452;织中活性较高，幼è= 73;组织中活性较弱。这= 是因为过氧化物酶能= 0351;组织中所含的某些఑= 9;水化合物转化成木质&= #32032;，增加木质化程度A= 292;而且发现早衰减产的= ;水稻根系中过氧化物&#= 37238;的活性增加，所以Ű= 07;氧化物酶可作为组织= 老化的一种生理指标= 2290;此外，过氧化物同ॣ= 7;酶在遗传育种中的重&= #35201;作用也正在受到重#= 270;。

通过本实验学习并þ= 84;握过氧化物酶活性测= 定的原理及方法。

&= nbsp;

二、原理

过氧化物酶催化过Ĕ= 87;化氢氧化酚类的反应= ，产物为醌类化合物，ઽ= 2;化合物进一步缩合或&= #19982;其他分子缩合，ߝ= 5;生颜色较深的化合物&= #12290;本实验以邻甲氧基!= 519;酚（即愈创木酚）为= ;过氧化物酶的底物，&#= 22312;此酶存在下，H₂O₂可将邻甲氧基苯酚Ĕ= 87;化成红棕色的4-邻甲氧基&#= 33519;酚，其反应为：

红棕色的物质可用Ñ= 98;光光度计在470nm处测= 定其消光值，即可求= 0986;该酶的活性。

&= nbsp;

三、实验&#= 26448;料、主要仪器和试Ò= 58;

1．材料

水稻根系，马铃薯ß= 59;茎等。

&= nbsp;

2．仪器

（1）分光光&#= 24230;计

（2）移液管

（3）离心机&#= 65288;4 000r/min）<= /p>

（4）秒表

（5）研钵

（6）天平

&= nbsp;

3．药品

（1）= 0.1mol/L Tris-HCl缓冲液（pH8.5）<= /p>

取12.114g三羟甲基氨基甲= 烷（Tris），加水稀释，用HCl调pH8.5后定= 容1 000mL。<= /p>

&= nbsp;

（2）= 0.2 mol/L磷酸缓冲&#= 28082;（pH6.0）<= /p>

贮备液A：= 0.2 mol/L NaH₂PO₄溶液（27.8g NaH₂PO₄·H₂O配成= 1 000mL）。=

贮备液B：= 0.2 mol/L Na₂HPO₄溶液（53.65g Na₂HPO₄·7H₂O或<= st1:chmetcnv UnitName=3D"g" SourceValue=3D"71.7" HasSpace=3D"False" Negative=3D"False" N= umberType=3D"1" TCSC=3D"0" w:st=3D"on">71.7g Na₂HPO₄·12H₂O配成= 1 000mL）。=

分别取贮备液A 87.7mL与贮= 备液B 12.3mL充分= 混匀并稀释至200mL。<= /p>

&= nbsp;

（3）反应混&#= 21512;液

取0.2 mol/L磷酸= 缓冲液（pH6.0）<= span lang=3DEN-US>50mL，过= 氧化氢0.028mL，愈创木酚0.019mL混合。

&= nbsp;

四、操作&#= 27493;骤

1．酶液提= 462;：取不同水稻根系= （根系表面水分吸干= 5289;1g，剪碎置于研钵= 中，加5mL 0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液（pH8.5），研磨成匀浆= ，以4 000r/min离心= 5min，倾= 出上清液，必要时残= 8195;再用5mL缓冲= 液提取一次，合并两= 7425;上清液，保存在冰౞= 5;（或冷处）备用。

&= nbsp;

2．取光径1cm比色杯2个，向其中之一= 加入上述酶液1mL（如酶活性过高= 可稀释之），再加入= 1453;应混合液3mL，立= 即开启秒表记录时间= 5307;而向另一比色杯中ࡃ= 2;入0.2 mol/L磷酸= 缓冲液（pH6.0），= 作为零对照。用分光= 0809;度计在470nm波长= 下测定反应5min时的= 光密度值。

&= nbsp;

五、结果&#= 35745;算

以每分钟光密度变Ô= 70;（以每分钟OD_470nm变化= 0.01为<= span lang=3DEN-US>1个活力单&#= 20301;）表示酶活性大小ʌ= 92;即

过ૐ= 7;化物酶活力	=3D	△OD_470nm
min<= /span>·mg（FW）

&= nbsp;

六、附注

酶的提取纯化需在低温ߍ= 9;进行。